鬼筆環(huán)肽是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏的環(huán)狀七肽毒素,以高親和力(Kd=20nM)選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin,而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合,通常用來標(biāo)記組織切片,細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系中的F-actin,從而對(duì)F-actin進(jìn)行定性和定量分析。另外,鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維,無論是動(dòng)植物來源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞,按照每一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基約與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的計(jì)量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略,染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識(shí)度非常明顯。因此,鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動(dòng)蛋白(Actin)抗體進(jìn)行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小,直徑約12-15Å,分子量<2000Daltons,未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白(Actin)的許多生理特性都得以維持,比如,同肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNaseI等仍能發(fā)生反應(yīng);鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì);以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。
鬼筆環(huán)肽的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品為FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,染色反應(yīng)特異性強(qiáng),對(duì)比性高,具有比Actin抗體更好的染色效果,適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。另外,經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性,適用性廣泛。
鬼筆環(huán)肽的注意事項(xiàng):
鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITONX-100處理。
藥品價(jià)格昂貴,0.1mg的售價(jià)接近兩千元,要節(jié)約使用。
毒性較大,戴上手套操作。